Técnica de microscopía Mejora revela nuevos conocimientos sobre las células Asociación processesAmerican para el video Avance de la ScienceLoading ...VIDEO: PCC individuales y clatrina placas (verde) y cortical F-actina (rojo) se muestran en un punto temporal durante su evolución en un cell.view COS-7 más

Crédito: [Crédito: Li et al. (Science2015)]

Este comunicado de prensa está disponible inJapanese.

Los investigadores han ampliado considerablemente la resolución de vivir de células microscopía Estructurado Iluminación (SIM), un tipo de microscopía que ofrece muchas ventajas en comparación con otras técnicas de súper resolución. Los resultados ya están proporcionando una comprensión mucho más detallada de los procesos celulares y podrían tener importantes implicaciones para la investigación en salud. En la actualidad, muchos otros microscopios súper resolución vienen con trampas; por ejemplo, la microscopía de localización y estimulado microscopía de agotamiento de emisión deben utilizar altos niveles de intensidad de iluminación y marcadores fluorescentes con el fin de adquirir imágenes, que pueden dañar las células vivas, incluso después de períodos cortos de tiempo. SIM utiliza niveles mucho más bajos de intensidad de la iluminación, pero hasta la fecha su resolución se ha limitado a dos veces el límite de difracción. Para mejorar la resolución de SIM, Dong Li et al. utiliza un objetivo mayor apertura numérica (NA). Superior NA no sólo mejoró la resolución de SIM a partir de 100 nanómetros a 84 nanómetros, pero limita la excitación de sólo una pequeña fracción del volumen celular, reduciendo aún más la fototoxicidad y la eliminación de fondo fuera de foco. En un segundo enfoque, el equipo utilizó rayas de la iluminación en una longitud de onda para activar un subconjunto de proteínas fluorescentes y luego inducida estos para emitir fluorescencia utilizando un patrón de rayas en una segunda longitud de onda; combinado, los dos patrones de iluminación ofrecen una resolución 62 nanómetros, una resolución mucho mejor que se podría obtener con un solo patrón. Ya, los investigadores han usado estas técnicas mejoradas de resolución para obtener nuevos conocimientos sobre los procesos celulares. Por ejemplo, los científicos debaten el papel de una proteína llamada actina en la endocitosis mediada por clatrina (un proceso por el cual las células engullir moléculas), sino a través de una mejor resolución en SIM, Li et al. fueron capaces de confirmar que la presencia de actina aumenta la probabilidad de que clatrina ayudará a moléculas de ser absorbidos por una célula. Su trabajo explora varios otros procesos celulares, proporcionando imágenes hermosas y excepcional detalle de las proteínas que interactúan. En este documento se acompaña con un activo multimedia que incluye entrevistas con el premio Nobel Eric Betzig y autor principal Dong Li, explicando su trabajo y sus aplicaciones.